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Aplicação HPLC | Separação de bases de pirimidina e purina no modo HILIC

A separação dos compostos escolhidos entre as bases de purina e pirimidina foi estudada usando cromatografia de interação hidrófila (HILIC).

A retenção dos analitos foi estudada variando ACN%, concentração de formato de amônio, pH e temperatura da coluna.

Os resultados obtidos confirmaram a ordem de eluição de nucleobases e nucleósidos sobre a sua hidrofobicidade.

 

Parâmetros do método

Column

Eurospher II 100-5 HILIC, 150 x 3 mm
Phase Eurospher II 100-5 HILIC
ConditionsEluent:

  • A: 5 mM Ammonium acetate pH 4.3
  • B: Acetonitrile

Gradient: Isocratic 80 % B
Flow rate: 0.6 ml/min
Temperature: 25 °C
Volume: 1 µL

DetectionUVD 2.1L with 10 mm flow cell: 254 nm, 20 Hz, 0,5 s
Substances3,5- Di-tert-butyltoluene (9.2 mg/ml) dead time marker, Adenine (0.15 mg/ml),
Cytosine (0.20 mg/ml), Uracil (0.14 mg/ml)
Chromatogram1. 3,5- Di-tert-butyltoluene | (9.2 mg/ml)
2. Uracil | (0.14 mg/ml)
3. Adenine | (0.15 mg/ml)
4. Cytosine | (0.20 mg/ml)Cromatograma Separação de bases de pirimidina e purina no modo HILIC


Baixe a aplicação completa aqui.

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