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Solução de Problemas HPLC | Picos largos HPLC

Problema no formato dos picos HPLC – Picos largos

Eventualmente, em sua análise HPLC, você encontra algum problema no formato dos picos. Neste post vamos analisar os picos largos.
Experimente resolver esse problema com base no neste guia:

Causa provávelSolução do problema
1. Composição da fase móvel mudou.Prepare nova fase móvel.
2. Vazão da fase móvel está muito baixa. Não está na curva ótima de van Deemter. Ajuste a vazão.
3. Vazamento, em especial entre a coluna e o detector. Picos ficarão mais largos com altura menor!Verifique o sistema por conexões soltas. Verifique se há vazamentos na bomba, formação de cristais de sal ou barulhos incomuns. Troque os selos da bomba se necessário.
4. Configurações do detector incorretas. Ajuste as configurações do detector.
5. Efeitos extra-coluna:

  1. Sobrecarregamento da coluna. Picos ficarão largos com altura maior.
  2. Tempo de resposta do detector ou volume de célula muito grande.
  3. Tubulação entre a coluna e o detector é muito longa ou seu diâmetro muito largo.
  4. Tempo de resposta do software muito alto.
 Comentários:

  1. Injete volumes semelhantes ou diluições da amostra (por exemplo: 1:10, 1:100).
  2. Reduza o tempo de resposta ou use uma célula menor.
  3. Use uma tubulação de 0,007 – 0,010 “ de diâmetro interno, com tubulações menores.
  4. Reduza tempo de resposta.
6. Concentração do tampão muito baixa. Os picos ficarão largos  sem cauda, etc. Aumente a concentração.
7. Pré-coluna contaminada. Troque a pré-coluna.
8. Coluna contaminada/ muito usada. Substitua a coluna com uma coluna nova do mesmo tipo.
9. Vazio na entrada da coluna. Substitua a coluna.
10. O pico representa dois ou mais compostos com pouca resolução. Troque o tipo de coluna para melhorar a separação.
11. Temperatura da coluna muito baixa. Aumente a temperatura. Não exceda a temperatura recomendada (45oC para Eurospher e 90oC para Eurokat).

Confira também os posts detalhados que estamos fazendo dos outros problemas do guia em nosso blog nesse link.


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